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  1. 因?yàn)樵松锶狈Ψg后的修飾,所以表達(dá)的真核蛋白和真核中表達(dá)有所差異,可能沒(méi)有生物學(xué)活性等,但是要是做免疫原應(yīng)該沒(méi)問(wèn)題;

  2. 基因需為cDNA,不能含有內(nèi)含子,原核細(xì)胞不能對(duì)mRNA進(jìn)行剪切;

  3. 要分析DNA序列信息,分析其密碼子,由于原核與真核生物的密碼子偏好性不同,所以有時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)稀有密碼子而影響表達(dá)的情況;

  4. 要注意你要表達(dá)蛋白的大小問(wèn)題,一般情況下大于70KD的蛋白在原核菌種不容易表達(dá)或表大量低;

  5. 原核表達(dá)出來(lái)的一般是包涵體,所以蛋白的復(fù)性很關(guān)鍵,否則表達(dá)出來(lái)了也不能用,沒(méi)有活性。

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