Pfu DNA 聚合酶為大腸桿菌重組產(chǎn)品, 能部分糾正DNA擴(kuò)增過(guò)程中產(chǎn)生的錯(cuò)誤，Pfu的超常糾錯(cuò)特性是由該酶本身的性質(zhì)決定的，
反應(yīng)條件如Mg2+, dNTP濃度，擴(kuò)增的循環(huán)次數(shù)，模板量，酶添加量都會(huì)影響PCR擴(kuò)增產(chǎn)物的正確率。
其它高溫DNA聚合酶與Pfu混合使用，可以部分提高擴(kuò)增效率，降低產(chǎn)品的擴(kuò)增。在基因克隆、
表達(dá)和基因突變分析等分子生物操作，對(duì)DNA擴(kuò)增產(chǎn)物的正確率要求特高，
選擇Pfu DNA聚合酶是比較理想的選擇。
是一種基于Pfu DNA Polymerase改造而成的新一代超保真DNA聚合酶，大大提高了擴(kuò)增速度、保真性和產(chǎn)量。
其保真度是普通Taq酶的54倍以上，是Pfu酶的6倍以上；
且擴(kuò)增速度可以達(dá)到15 sec/kb，可超保真快速擴(kuò)增3 kb以內(nèi)的復(fù)雜DNA模板或6 kb以內(nèi)的簡(jiǎn)單DNA、
質(zhì)粒和噬菌體DNA模板，是非長(zhǎng)片段超保真擴(kuò)增的首選用酶。
實(shí)驗(yàn)用途：常規(guī)PCR，基因的高保真擴(kuò)增，克隆和表達(dá)，基因的定點(diǎn)突變。
聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng),因?yàn)槠浞奖?快捷,準(zhǔn)確地大規(guī)模復(fù)制目的基因片段的能力,已經(jīng)成為了分子生物學(xué)不可或缺的技術(shù)手段,
其在人類基因組計(jì)劃以及后續(xù)的人類蛋白質(zhì)組計(jì)劃中都起著不可替代的作用。
至其誕生以來(lái),在全世界各國(guó)科學(xué)家的共同努力下,該技術(shù)已經(jīng)獲得的長(zhǎng)足的進(jìn)步。
如熱循環(huán)儀的發(fā)明,大大節(jié)約了反應(yīng)時(shí)間,節(jié)省了研究者的精力;
逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)則可用于檢測(cè)細(xì)胞/組織中基因表達(dá)水平,細(xì)胞中RNA病毒的含量和直接克隆特定基因的cDNA序列等;
實(shí)時(shí)定量聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)的發(fā)明,則使得精確定量測(cè)定特定DNA片段個(gè)拷貝數(shù)成為可能。
如今,該技術(shù)憑借其諸多優(yōu)勢(shì),在諸多領(lǐng)域,如醫(yī)學(xué)檢測(cè)、感染性疾病檢測(cè)、法醫(yī)學(xué)檢測(cè)分子進(jìn)化等,成為無(wú)法取代的技術(shù)手段。
作為聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)中的核心工具,DNA聚合酶在聚合反應(yīng)中極為重要,其性能會(huì)直接影響產(chǎn)物的特異性、產(chǎn)量、
保真性等各種特性,因此高性能的DNA聚合酶的獲得對(duì)分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)來(lái)所就顯得非常關(guān)鍵。
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